10楼: Originally posted by stogqy at 2018-09-07 16:17:15
哎呀，之前放暑假回家了，没看到不好意思。我现在遇到的情况就是同源臂能单交换整合上去，但是质粒骨架掉不能通过二次交换掉下来~~...

11楼: Originally posted by 日光海 at 2018-09-08 09:05:42
相当于你是做两次单筛选，第一次抗性平板验证单交换，第二次用致死物质进行反筛选，这样第二个平板上能长的菌要不就是敲除株，要不就是回复突变株，理论上来说，这两者比例应该是1：1。建议加大样本量，得到更多第 ...

12楼: Originally posted by stogqy at 2018-09-08 14:20:39
理论上是这样的啊，可实践起来真坑！不过不知道哪里飘来的运气，昨天好像拿到了一个二次重组菌，初步验证了，准备明天做测序看看。...