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为什么在等温扩增低浓度Target的荧光扩增曲线会产生如此怪异的变化？？？求问
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我在做等温扩增时使用MB探针进行real-time测定目标DNA，使用的仪器为伯乐的CFX-96，所得数据的纵坐标单位为RFU，横坐标为Cycle，做不同浓度的real-time曲线时正常曲线定量图如图1，而我的实验结果却是如图2所示，即： 当目标DNA浓度较高（>=10-13M）时出现拐点前的基线均在一个水平上，但是当目标DNA浓度较低（比如10-15M和NTC）时，所出现的realtime 曲线发生怪异变化，整条曲线仿佛以某一点为支点顺时针整个旋转了15度左右，从而使得本来的10-15M的扩增曲线发生了变化。 请问一下各位大神，这是由于仪器自身读数造成的还是由于扩增时间过长所引起的某些实验副反应所导致的？各位有没有遇到过这种情况???请指教 图1  图2  |
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2015-09-29 00:03:25, 14.51 K
2015-09-29 00:03:25, 15.22 K
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andywang6137
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