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2011@xmc

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位大神怎么避免做质粒的标准曲线时空白对照的污染?已有1人参与

各位大神,我正在做质粒的标准曲线的绝对定量,但是每次都会在空白对照中有污染。循环数降到35就达不到平台期了,然后换了个一直没做实验的实验室也会有污染,所有的试剂耗材(除了DNA)在紫外线下照射、加上矿物油也会有污染。跪求各位大神提提意见,怎么避免污染吖,才开始做定量pcr不久,老师催的急。。。。图中标红色的对应H12和A1是空白对照,其他的是按10倍浓度梯度(从100ng/μl开始)稀释的质粒。

各位大神怎么避免做质粒的标准曲线时空白对照的污染?
图中标红色的对应H12和A1是空白对照


各位大神怎么避免做质粒的标准曲线时空白对照的污染?-1
图中标红色的对应H12和A1是空白对照
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等待是一生最初苍老!
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2011@xmc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by heyongliu at 2015-09-29 15:09:27
有可能是引物设计不好,自身有一定延伸

如果是引物自身的延伸问题就会出现非特异性了,我用凝胶电泳时没有非特异性条带。。
等待是一生最初苍老!
12楼2015-09-30 12:12:12
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zgb1982

木虫 (正式写手)

考虑试剂本身背景太强?

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-09-28 17:19:40
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zgb1982

木虫 (正式写手)

3楼2015-09-28 17:20:24
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zgb1982

木虫 (正式写手)

4楼2015-09-28 17:21:29
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