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yznihaoa

新虫 (小有名气)

[交流] BSA电泳图片正常吗? 已有8人参与


样品浓度依次为25ug,50ug,75,100ug,150ug,125ug ; 依次上样5ug,10ug,15ug,20ug,
25ug,7.5ug,12.5ug,
第二个 maker 是被样品拖斜了;
样品是不同浓度的BSA, BSA是干粉称重ddH2O溶解,定量为10mg/ml,
加Sample Buffer,沸水煮10min,
分析   1. BSA 标准大小为66 KD, 应该为一条较细的条带,我的条带不仅一条,而且交宽,66KD条带上下都有条带,是什么原因 ?是因为煮过了还是 煮的不够? 上面 两条带  与下面一条带,主要是什么原因?
2 . 煮过的BSA 下次实验还需要煮?多久?

BSA电泳图片正常吗?
BSA 标准样品实验
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314300420

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顶部条带为多聚体,加还原剂DTT或者巯基乙醇可以缓解,下方的是降解的BSA或者杂蛋白,根本问题在于上样量太高,降低10~20倍可以有效缓解

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-09-27 11:21:41
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syhzlsd

木虫 (小有名气)

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建议你不要煮,加上样buffer后直接点样,还有你的上样量太多了,上到2ug就差不多了!
3楼2015-09-28 08:30:39
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cwc0421

新虫 (小有名气)

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上样量太大,一般0.5ug就能看得很清楚

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-28 10:22:45
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帖航

银虫 (小有名气)

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上样量太大,BSA你买的是标准品》不是纯的吧,哪些都是杂蛋白
5楼2015-09-28 16:13:01
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璧月

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我买的bsa也是这样子

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6楼2015-09-28 16:39:42
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袁1231

金虫 (小有名气)

这个BSA不纯
7楼2015-09-28 23:36:35
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jzhwang2007

至尊木虫 (文坛精英)

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纯度不好,建议用组分5.过载了,至少多1-2个数量级。
8楼2015-09-29 22:36:27
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u0299025

至尊木虫 (文坛精英)

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样品不纯,加样量太大。
9楼2015-09-29 22:38:46
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u0299025

至尊木虫 (文坛精英)

建议加到十分之一。
10楼2015-09-29 22:39:26
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