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杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] 荧光质粒转到hela细胞的问题 已有2人参与

最近做基因的真核表达,在hela细胞中表达,因为不知道目的基因是否转染到细胞内,所以同时用绿色荧光蛋白质粒转到细胞中做对照,(我的想法:如果荧光蛋白表达了,说明我的操作没问题,如果荧光蛋白不表达,说明可能是我的操作有问题),现在遇到的问题是:荧光显微镜下没有正常活细胞的荧光蛋白表达,但是荧光显微镜下的死细胞有荧光,这是为什么?

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越加油

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1:首先确定你的荧光质粒有没有问题,报告基因到底表不表达。
2:可能是转染时间短,荧光表达弱。可以转染时间长一点后再观察,增大显微镜曝光等。
3:转染条件没控制到最佳。
3:不同的细胞系对同一质粒敏感度不一样,可以考虑换别的细胞系看看。
2楼2015-09-24 18:11:57
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