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wxf1983

[求助] 溴化乙锭的毒害?

我做实验要用到溴化乙锭,听说它是种强的致癌剂,致畸剂,请问它有挥发性吗?做实验若小心谨慎点对人有伤害吗?我听到它的毒害后都不敢使用它,请问做实验需要作到怎样?我是位女生,很怕以后生孩子会有影响,请教各路高手指点下,谢谢!!!!!

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song7323

金虫 (正式写手)

由于EB是一种诱变剂,直接倒入水槽或扔进拉圾箱可能会带来危害。所以应该根据情况处理:

1. 电泳胶

胶里面痕量的EB没有问题,如果小于0.1%可以直接扔掉。而如果发红,即大于等于0.1%时应该放在生物危害柜中焚烧掉。

2. EB溶液

<10ug/ml 时可以直接倒入水槽

>10ug/ml 时应该用木炭过滤或化学方法使其失活(推荐用木炭过滤的方法)

溶液中还有重金属、氢化物、硫化物时应该按照危险垃圾处理

化学中和方法:

方法一:加等体积的漂白粉,搅拌4小时,静置4天,用NaOH调至pH4-9, 倒入排水沟的同时用大量水冲。

方法二:每100ml加5%磷酸,加12ml0.5M的NaNO3,搅拌并静置20小时,同上调pH, 倾倒。

3. 手套、设备等物品

放在医用垃圾中焚烧,如污染严重则用漂白剂处理。
3楼2008-09-01 13:03:07
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sanko211

荣誉版主 (职业作家)

小木虫扣篮王

分子式:C21H20BrN3
英文名:Ethidium bromide
分子量: 394.3139 g/mol
熔点:260 - 262 °C
为芳香族荧光化合物
EB(Ethidium bromide,溴化乙锭)

溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。

化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性!  

观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的NDA条带。

溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸(DNA或RNA)。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小,所以其荧光产率也相对较低。事实上,大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。

尽管在该染料存在的情况下,线状DNA的电泳迁移率约降低15%,因此,当需要知道DNA片段的准确大小(如DNA限制酶酶切图谱的鉴定),凝胶应该在无EB情况下电泳,电泳结束后用EB染色。染色完毕后,通常不需要脱色。但是在检测小量DNA(小于10ng)片段时,通常要将染色后的凝胶进行脱色。

溴化乙锭的损害

溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性!

SYBR Green I 和溴化乙啶(EB)Ames 测试结果显示EB容易引起有机体突变。(Singer et al., Mutat. Res. 199, 439: 37- 47.)

溴化乙锭溶液的净化处理

由于溴化乙锭具有一定的毒性,实验结束后,应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置,以避免污染环境和危害人体健康。

(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下处理:

①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml;

②加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4,混匀,再加入等量的25mol/L HCl,混匀,置室温数小时;

③加入一倍体积的2.5mol/L NaOH,混匀并废弃。

(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理:

① 按1mg/ml的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置1小时;

② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。

*EB=Employee Benefit 企业员工福利计划。
2楼2008-09-01 12:59:53
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