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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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astwenth

新虫 (初入文坛)

[求助] 跪求铁皮石斛RNA提取方法 已有6人参与

急急急， 各位大神，小弟最近尝试用过各种方法提过铁皮石斛的RNA，用过TIANGEN公司的多糖多酚试剂盒，天恩泽公司的植物RNAout试剂盒，并且送到3家生物公司去提取过，结果提取效果都不好，有的很模糊，有的直接没有。有提过这种药用植物或者同学提过这种药物的大神吗？有的话麻烦指导一下小弟，不胜感激。上传的有两张最近公司提取得到的RNA图片。跪求铁皮石斛RNA提取方法
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跪求铁皮石斛RNA提取方法-1
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  • 附件 1 : RNA.Tif
    • 2015-09-21 17:56:41, 1.25 M

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1楼 2015-09-21 18:01:18
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naringenin

新虫 (小有名气)
引用回帖:
26楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-21 22:46:42
你好健忘吧，你说的是第一张图，可以做qRT-PCR，这肯定不合适吧
...

qRT-PCR片段只需要100多bp长度的模板左右就行，qRT-pcr的引物是oligo-dt和随机引物的混合物，有些降解并不影响反转录，并且降解基本对所有的RNA是一一致的，个人认为从原理上来看有些降解并不会影响结果。260/280在1.9以上，说明RNA纯度不错，是我的话，我就会用这个RNA做qRT了。
和您观点不同而已。
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28楼2015-09-21 22:52:45
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naringenin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
astwenth: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-23 14:42:58
提过藏红花，紫杉，雪莲，肉苁蓉，烟草，拟南芥，兰花，月季。
没提过铁皮石斛，不过这植物看上去还好，不应该是很难提取的样子啊，多尝试一些方法吧。
第一张图还可以啊，用来反转录做qrt-pcr是够了。
要是做转录组测序，或者做race的话，好像是有些降解了。
看完整性的话，条件好的话，用agilent2100检测一下就可以了，一般的琼脂糖电泳只能大概的看，不过我不太看好你的第一张图的完整性。
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2楼2015-09-21 19:29:44
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by naringenin at 2015-09-21 19:29:44
提过藏红花，紫杉，雪莲，肉苁蓉，烟草，拟南芥，兰花，月季。
没提过铁皮石斛，不过这植物看上去还好，不应该是很难提取的样子啊，多尝试一些方法吧。
第一张图还可以啊，用来反转录做qrt-pcr是够了。
要是做转 ...

二楼的貌似没提过RNA，第一张图都那个样子还说提的好，居心何在？

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3楼2015-09-21 21:02:52
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
astwenth: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-23 14:43:43
我提过一些比较难的，愿试试

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4楼2015-09-21 21:03:50
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