应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答中转子版 » PCR扩增+【有效期至2008.9.7】
51/1返回列表
查看: 227  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【悬赏金币】回答本帖问题，作者fortunate1将赠送您 4 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fortunate1

银虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增+【有效期至2008.9.7】

我在做PCR扩增时，扩增的电泳图只有二聚体并且二聚体的条带很亮，没有其它任何条带，是什么原因那？我想扩增的目的条带是1500bp左右，我设计的上游引物的Tm值是66.6，下游引物的Tm值是55，设定的退火温度是54度，延伸时间是1分30秒。请各位前辈指教，多谢！

[ Last edited by fortunate1 on 2008-9-6 at 21:34 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-08-31 09:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwlcxx

银虫 (小有名气)
★
fortunate1(金币+1,VIP+0):非常感谢，谢谢你
建议退火温度更改为58－60度之间的值，提高Mg2+浓度，以提高扩增的特异性。考虑降低引物的量，和增加模板量。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2008-09-01 17:07:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

ant5002

可能是 延伸时间不够吧!  其实我也不太清楚的!  呵呵!
赞一下 回复此楼
2楼2008-08-31 10:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjunem

至尊木虫 (职业作家)
建议适用高保真Taq酶，保证DNA模板没问题，延伸时间要延长
赞一下 回复此楼
3楼2008-08-31 10:11:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)
可能的原因可能是多方面的

除了上述大家说的建议
另外建议看看引物的设计是否有问题？
不知道你的模板是什么，你能确信扩增到的是二聚体而不是别的序列吗？可以测个序，或者做个酶切验证一下。
赞一下 回复此楼
生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
5楼2008-09-04 13:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290调剂生物0860 +28 哇哈哈，。 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 01:16 by 幸免 ..
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +12 yzyzx 2026-04-12 12/600 2026-04-13 00:08 by solbeg
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 计算机22408 281分，求调剂 +7 17715607211 2026-04-06 7/350 2026-04-12 00:43 by xuxiang
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 青岛科技大学材料学院，环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭