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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shisishese

银虫 (小有名气)


已领完
PCR退火温度的取舍
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请问一下,我做了退火温度梯度设定,最后如何根据结果选取最适合的那一个温度?有什么参照吗?
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shisishese

银虫 (小有名气)


引用回帖:
29楼: Originally posted by a610291425 at 2015-09-22 10:49:12
我经常做一代测序,我所采用的方法是设温度梯度扩增后跑胶,选择条带清晰明亮,片段大小与你引物设计一致的,并且没有非特异和二聚体的,退火温度对扩增影响蛮大的哦

多谢啦
30楼2015-09-22 20:19:26
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976592787

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-20 22:21:09
退火温度影响不是太大,你可以55度p试试行不,不行就换成58度p,一般p不出来是引物设计和聚合酶的问题,与退火温度关系不大

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3楼2015-09-20 16:27:32
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Neo2000

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
拿primer blast算一下就行了

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5楼2015-09-20 16:52:56
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15853830932

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Tm值左右,再看亮度

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10楼2015-09-20 17:30:52
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9765927872楼
2015-09-20 16:24   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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Neo20004楼
2015-09-20 16:52   回复  
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MAYINGTAI6楼
2015-09-20 16:54   回复  
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neu2347楼
2015-09-20 16:57   回复  
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2015-09-20 17:29   回复  
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2015-09-20 17:29   回复  
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lulujiwei11楼
2015-09-20 17:58   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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xingwancai12楼
2015-09-20 18:40   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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2015-09-20 19:23   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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梁子从14楼
2015-09-20 19:34   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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