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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR退火温度的取舍
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shisishese

银虫 (小有名气)
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PCR退火温度的取舍
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请问一下，我做了退火温度梯度设定，最后如何根据结果选取最适合的那一个温度？有什么参照吗？
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1楼 2015-09-20 16:24:08
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Mis_Q

银虫 (小有名气)
★
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我们一般情况就是在Tm上下几度范围内设梯度，然后把PCR产物跑琼脂糖凝胶，挑选没有非特异性条带且目标条带最亮的温度。
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23楼2015-09-21 15:01:29
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976592787

木虫 (正式写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-20 22:21:09
退火温度影响不是太大，你可以55度p试试行不，不行就换成58度p，一般p不出来是引物设计和聚合酶的问题，与退火温度关系不大

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3楼2015-09-20 16:27:32
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
拿primer blast算一下就行了

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5楼2015-09-20 16:52:56
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15853830932

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Tm值左右，再看亮度

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10楼2015-09-20 17:30:52
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9765927872楼
2015-09-20 16:24   回复  
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Neo20004楼
2015-09-20 16:52   回复  
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MAYINGTAI6楼
2015-09-20 16:54   回复  
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neu2347楼
2015-09-20 16:57   回复  
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冷雁孤旅8楼
2015-09-20 17:29   回复  
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158538309329楼
2015-09-20 17:29   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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lulujiwei11楼
2015-09-20 17:58   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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xingwancai12楼
2015-09-20 18:40   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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青铜器12313楼
2015-09-20 19:23   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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梁子从14楼
2015-09-20 19:34   回复  
shisishese(金币+1): 谢谢参与
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