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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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水草

[交流] 求助:大肠杆菌转化问题

我往大肠杆菌中转化12000bp的连接产物,km抗性,一般过夜都不长,第二三天才有菌落,我摇了10几个,什么都没摇起来,怎么回事呢?连接产物电泳了,好像有带,虽然看起来像载体自连。我该怎么办?

我的感受态没有问题,我用12000的质粒试过了,1微升就涨满板。

[ Last edited by 水草 on 2008-8-31 at 21:04 ]
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lipishun

金虫 (小有名气)

★ ★
水草(金币+2,VIP+0):我们换PROMEGA公司的了,似乎连上了,我要提质粒了!
请问你用的是什么公司的连接酶啊? 我觉得用PROMEGA公司的不错,虽然贵点。
6楼2008-09-03 15:34:16
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查看全部 8 个回答

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


水草(金币+1,VIP+0):15000都有转进去的。
外源片度太大了 再说你的感受态是不是有问题 16个小时不长 以后长的可能都是杂菌所以摇不起来
2楼2008-08-31 11:29:52
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lipishun

金虫 (小有名气)

★ ★
水草(金币+2,VIP+0):谢谢!
链接产物不大,可以尝试电转化!而且你做的感受态细胞估计不合格!没有达到要求!超过16或20小时的,一般都是无抗性的空E.coli。
3楼2008-08-31 13:17:15
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jfl315

木虫 (小有名气)

你确认没有km抗性吗!!!
4楼2008-08-31 13:30:47
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