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UCNP修饰DNA 已有1人参与
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之前发的没人应助，再发一遍，跪求大神指点。在PAA-UCNP上修饰NH2-DNA，主要参考了武大Wang等人的Aptamer biosensor based on fluorescence resonance energy transfer from upconverting phosphors to carbon nanoparticles for thrombin detection in human plasma[J]. Analytical chemistry, 2011, 83(21): 8130-8137.主要步骤如下： 1.5mg PAA-UCNP分散在2mLMES(10mM,PH5.5) 2.加入EDC ·HCl 0.8mg（2mM),NHS1.2mg(5mM),30℃缓慢振荡30min或1h； 3.离心（这一步水洗和未水洗都尝试过） 4.分散在2mL 含2.5μM NH2-DNA的HEPES buffer（10mM，PH7.2）； 5.30℃，反应过夜； 6.离心，HEPES洗涤3次，最后分散在2mL Tris-HCl(10mM,PH7.4) 从表征结果上看，并没有修饰成功。不知道是不是活化的时间不够？EDC/NHS的比例有问题吗？还是后面的偶联有问题。 有木有做过类似的，希望可以给点建议，大谢！ |
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2楼2015-09-18 14:35:40
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