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用WB能同时检测多种蛋白质,可行吗? 已有5人参与
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各位大侠,没做过细胞实验的菜鸟我要开始做实验了,可是,还没试验就钻胡同了 求各路大侠指点一二,感激不尽:我需要在养细胞后测定细胞内四种蛋白质的含量,可以用western blot吗?如果用WB,是用传说中的跑出不同蛋白质 后再将胶剪开,分别加抗体,这种方法吗?还是说有其他方法? 谢谢大侠们 菜鸟 |
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18761615793
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Autum: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-01-10 17:07:47
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Autum: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-01-10 17:07:47
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果真是菜鸟,哈哈,没事的 当然可以同时检测多种蛋白,不过是这样的,你要检测的蛋白是带同样的标签吗?因为WB就是根据蛋白带的标签才能和他结合,从而检测出蛋白(这点主要是WB的原理),如果你的四中是带同样的标签,就不需要剪开了,实验做到最后依然是一张完整的膜,如果不是带一样的标签,那就要剪膜,所以说在SDS PAGE上样的的时候就要注意了,带相同标签的点样要在一起,这样在抗体孵育的时候好剪膜,我们一般一抗二抗都是一起加孵育很正常,瞬时转染后的细胞产物还是比较好检测的~比一般的原核蛋白处理简单一点~好运 |

7楼2015-09-18 14:44:48
2楼2015-09-17 17:14:49
3楼2015-09-18 10:11:25
4楼2015-09-18 11:33:21











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