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小鱼儿11

金虫 (小有名气)

[交流] 构建突变体遇到麻烦了

我做的突变体,七天前天PCR检测有突变体条带,到今几天就扩不出来了,而且平板上的菌落减少了,可以解答一下吗?

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66了可

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
突变体不稳定,并且生存能力比正常菌株弱,本身不易生长。突变体如果还未稳定就见光培养,变异会复性,有没有可能是你见光培养。

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2楼2015-09-14 22:42:44
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小鱼儿11

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 66了可 at 2015-09-14 22:42:44
突变体不稳定,并且生存能力比正常菌株弱,本身不易生长。突变体如果还未稳定就见光培养,变异会复性,有没有可能是你见光培养。

你说的是紫外照射的那种突变吗?我的是单交换突变,也一样吗?

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3楼2015-09-15 09:46:09
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DYP125

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你做的是PCR的定点突变吗?然后你的PCR的东西是怎么保存的呢?还有平板上的什么菌少了?说的具体一点
加油。。。
4楼2015-09-15 10:13:31
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纳米之心

木虫 (文坛精英)

祝福楼主
火星人要回火星了!!!
5楼2015-09-15 10:23:29
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小鱼儿11

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by DYP125 at 2015-09-15 10:13:31
你做的是PCR的定点突变吗?然后你的PCR的东西是怎么保存的呢?还有平板上的什么菌少了?说的具体一点

对,是PCR的定点突变,之前检测了三次均有目的条带,然后把平板放了4摄氏度冰箱保存,一个星期后扩不出来了,而且突变体的菌数也越来越少。。。这是怎么回事呀

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6楼2015-09-15 10:33:21
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
运用新型的反向PCR策略高效构建基因的点突变体
http://www.docin.com/p-592019197.html
7楼2015-09-15 10:40:59
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