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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】植物总DNA提取的好方法
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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】植物总DNA提取的好方法

请问谁有提取植物总DNA比较好的方法，我是做酶切用的，之后要做Southern的，要求DNA的纯度比较高，我提了很多次，每次杂质都很多，根本就不能做酶切，请问哪位虫友有更好的方法提供给我，先谢谢了！
[search]植物总DNA的提取[/search]
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坚持就是胜利！
1楼 2008-08-28 10:44:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):感谢答复
杂质多不怕，跑下电泳做胶回收就是了
当然也有可以直接纯化的试剂盒
也有人是用蛋白酶K消化然后再纯化
效果都是不错的
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2楼2008-08-28 14:45:37
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
是不是材料不太好啊，多纯化几次试试？
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
3楼2008-08-28 18:56:55
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figo.339

木虫 (著名写手)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
我用过CTAB法和SDS法，都挺好的
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4楼2008-08-28 19:02:19
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xipha

木虫 (正式写手)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
植物里面有很多糖、酚，建议用热硼酸法，网上有，搜一下，做southern没有问题
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5楼2008-08-29 10:34:57
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yangxiaofei

你提的是什么材料啊，常规材料用常规方法就可以了，如果有问题可能是你操作的问题，如果非常规材料就发出来，看大家都 有什么经验
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6楼2008-08-29 11:58:09
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mythqu

新虫 (初入文坛)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
CTAB法可行的，我用的就是，主要是操作时多注意就可以了，之后做Southern效果很好的。主要是操作时多注意就可以了。
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基因克隆
7楼2008-08-29 13:52:31
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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangxiaofei at 2008-8-29 11:58:
你提的是什么材料啊，常规材料用常规方法就可以了，如果有问题可能是你操作的问题，如果非常规材料就发出来，看大家都 有什么经验

我提的是杨树的DNA，每次效果都不好 郁闷！
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坚持就是胜利！
8楼2008-08-29 19:16:48
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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xipha at 2008-8-29 10:34:
植物里面有很多糖、酚，建议用热硼酸法，网上有，搜一下，做southern没有问题

我看了热硼酸法好像都是提RNA的 没有提DNA的呀？
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坚持就是胜利！
9楼2008-08-29 20:34:59
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boouy

银虫 (正式写手)
★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
强烈推荐：Fulton TM, Chunwongse J, and Tanksley SD. (1995) Microprep Protocol for Extraction of DNA from Tomato and other Herbaceous Plants. Plant Molecular Biology Reporter 13 (3): 207-209
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10楼2008-08-30 13:21:16
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