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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】植物总DNA提取的好方法

请问谁有提取植物总DNA比较好的方法,我是做酶切用的,之后要做Southern的,要求DNA的纯度比较高,我提了很多次,每次杂质都很多,根本就不能做酶切,请问哪位虫友有更好的方法提供给我,先谢谢了!
[search]植物总DNA的提取[/search]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):感谢答复
杂质多不怕,跑下电泳做胶回收就是了
当然也有可以直接纯化的试剂盒
也有人是用蛋白酶K消化然后再纯化
效果都是不错的
2楼2008-08-28 14:45:37
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

是不是材料不太好啊,多纯化几次试试?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
3楼2008-08-28 18:56:55
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figo.339

木虫 (著名写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
我用过CTAB法和SDS法,都挺好的
4楼2008-08-28 19:02:19
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xipha

木虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
植物里面有很多糖、酚,建议用热硼酸法,网上有,搜一下,做southern没有问题
5楼2008-08-29 10:34:57
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yangxiaofei

你提的是什么材料啊,常规材料用常规方法就可以了,如果有问题可能是你操作的问题,如果非常规材料就发出来,看大家都 有什么经验
6楼2008-08-29 11:58:09
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mythqu

新虫 (初入文坛)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
CTAB法可行的,我用的就是,主要是操作时多注意就可以了,之后做Southern效果很好的。主要是操作时多注意就可以了。
基因克隆
7楼2008-08-29 13:52:31
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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yangxiaofei at 2008-8-29 11:58:
你提的是什么材料啊,常规材料用常规方法就可以了,如果有问题可能是你操作的问题,如果非常规材料就发出来,看大家都 有什么经验

我提的是杨树的DNA,每次效果都不好 郁闷!
坚持就是胜利!
8楼2008-08-29 19:16:48
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zuolili213

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xipha at 2008-8-29 10:34:
植物里面有很多糖、酚,建议用热硼酸法,网上有,搜一下,做southern没有问题

我看了热硼酸法好像都是提RNA的 没有提DNA的呀?
坚持就是胜利!
9楼2008-08-29 20:34:59
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boouy

银虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
强烈推荐:Fulton TM, Chunwongse J, and Tanksley SD. (1995) Microprep Protocol for Extraction of DNA from Tomato and other Herbaceous Plants. Plant Molecular Biology Reporter 13 (3): 207-209
10楼2008-08-30 13:21:16
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