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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 填料粒径减小分离度却降低了，不理解，请各位高手指点！
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yixiaonan

铜虫 (小有名气)

[交流] 填料粒径减小分离度却降低了，不理解，请各位高手指点！ 已有3人参与

我们用反相分析一重组蛋白，之前用的是粒径为5微米的C4柱，后为了提高分离度购进了粒径为3.5微米的C4色谱柱，但分离效果还不如之前的。
不是减小粒径会提高分离度么?不知道问题出在哪里，还请诸位高手指点迷津！
非常感谢！
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superyeast

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好好学习，天天向上！
1楼 2015-09-11 17:02:55
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yixiaonan

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-17 11:23:44
你需要把详细条件贴出来才能试图分析。
分蛋白时常常需要对柱子加热，甚至很热。比方你那个AdvanceBioRP的应用示例就加热到了80度。你加到那么高了吗？
...

不好意思，我们用的是Agilent AdvanceBio RP-mAb  
货号为793975-904 C4, 4.6 x 150 mm, 3.5 μm的柱子，我们在60度的条件下进行分析的，他们的测试报告上用的也是60度。
流动相A：水+0.1%TFA
流动相B：乙腈+0.1%TFA
流速1.0ml/min
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好好学习，天天向上！
8楼2015-09-18 14:22:26
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啃树叶的虫

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白的容易堵，你变小的会不会堵了？如果方便我可以给你找些实际检测的实例给你参考参考。
赞一下(1人) 回复此楼
我散金币啦
2楼2015-09-11 17:25:24
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yixiaonan

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 啃树叶的虫 at 2015-09-11 17:25:24
蛋白的容易堵，你变小的会不会堵了？如果方便我可以给你找些实际检测的实例给你参考参考。

好呀，如果是堵了会怎么样？
非常感谢你呀！
赞一下 回复此楼
好好学习，天天向上！
3楼2015-09-11 17:27:00
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沸腾才精彩

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
至少给个图谱才能看出来

发自小木虫Android客户端
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试问天下谁不难！
4楼2015-09-12 01:01:15
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