24小时热门版块排行榜    

查看: 1561  |  回复: 13

yixiaonan

铜虫 (小有名气)

[交流] 填料粒径减小分离度却降低了,不理解,请各位高手指点! 已有3人参与

我们用反相分析一重组蛋白,之前用的是粒径为5微米的C4柱,后为了提高分离度购进了粒径为3.5微米的C4色谱柱,但分离效果还不如之前的。
不是减小粒径会提高分离度么?不知道问题出在哪里,还请诸位高手指点迷津!
非常感谢!
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

好好学习,天天向上!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

superyeast

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
分蛋白不光要看颗粒度,还要看孔径。一般小分子用的100埃填料就不适合。做蛋白分离应该用300埃附近孔径的填料。

发自小木虫Android客户端
5楼2015-09-12 06:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啃树叶的虫

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白的容易堵,你变小的会不会堵了?如果方便我可以给你找些实际检测的实例给你参考参考。
我散金币啦
2楼2015-09-11 17:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yixiaonan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 啃树叶的虫 at 2015-09-11 17:25:24
蛋白的容易堵,你变小的会不会堵了?如果方便我可以给你找些实际检测的实例给你参考参考。

好呀,如果是堵了会怎么样?
非常感谢你呀!
好好学习,天天向上!
3楼2015-09-11 17:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沸腾才精彩

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
至少给个图谱才能看出来

发自小木虫Android客户端
试问天下谁不难!
4楼2015-09-12 01:01:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixiaonan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-12 06:19:58
分蛋白不光要看颗粒度,还要看孔径。一般小分子用的100埃填料就不适合。做蛋白分离应该用300埃附近孔径的填料。

您好!
我们用的是AdvanceBio RP-mAb C4的柱子,粒径3.5微米,孔径是450埃的。
之前用的C4柱子粒径是5微米,孔径是300埃的。
您能帮我分析分析吗?
我是个菜鸟,请多指教哈!
好好学习,天天向上!
6楼2015-09-16 09:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyeast

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by yixiaonan at 2015-09-15 17:38:45
您好!
我们用的是AdvanceBio RP-mAb C4的柱子,粒径3.5微米,孔径是450埃的。
之前用的C4柱子粒径是5微米,孔径是300埃的。
您能帮我分析分析吗?
我是个菜鸟,请多指教哈!...

你需要把详细条件贴出来才能试图分析。

分蛋白时常常需要对柱子加热,甚至很热。比方你那个AdvanceBioRP的应用示例就加热到了80度。你加到那么高了吗?

发自小木虫Android客户端
7楼2015-09-17 11:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixiaonan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-17 11:23:44
你需要把详细条件贴出来才能试图分析。
分蛋白时常常需要对柱子加热,甚至很热。比方你那个AdvanceBioRP的应用示例就加热到了80度。你加到那么高了吗?
...

不好意思,我们用的是Agilent AdvanceBio RP-mAb  
货号为793975-904 C4, 4.6 x 150 mm, 3.5 μm的柱子,我们在60度的条件下进行分析的,他们的测试报告上用的也是60度。
流动相A:水+0.1%TFA
流动相B:乙腈+0.1%TFA
流速1.0ml/min
好好学习,天天向上!
8楼2015-09-18 14:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixiaonan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-17 11:23:44
你需要把详细条件贴出来才能试图分析。
分蛋白时常常需要对柱子加热,甚至很热。比方你那个AdvanceBioRP的应用示例就加热到了80度。你加到那么高了吗?
...

待分析样品理论分子量为70000Da
好好学习,天天向上!
9楼2015-09-18 14:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyeast

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yixiaonan at 2015-09-17 22:22:26
不好意思,我们用的是Agilent AdvanceBio RP-mAb  
货号为793975-904 C4, 4.6 x 150 mm, 3.5 μm的柱子,我们在60度的条件下进行分析的,他们的测试报告上用的也是60度。
流动相A:水+0.1%TFA
流动相B:乙腈+0. ...

流动相比例呢?

发自小木虫Android客户端
10楼2015-09-19 23:21:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yixiaonan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 0856材料求调剂 +3 麻辣鱿鱼 2026-02-28 3/150 2026-03-01 14:06 by yc258
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 高分子化学与物理调剂 +5 好好好1233 2026-02-28 9/450 2026-03-01 10:59 by fengyu211
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
信息提示
请填处理意见