| 查看: 1543 | 回复: 4 | ||
酸奶一号银虫 (小有名气)
|
[求助]
丝状真菌菌丝细胞中ROS检测
|
|
各位虫友，大家好，小虫目前在做有关A.flavus菌丝中ROS检测，简述如下： 实验分组为control对照组（只加细胞）、损伤组（加细胞，然后用双氧水损伤）、实验组（加细胞，后加药品处理）。实验结束时吸取菌丝球经PBS洗涤后，加入浓度为10uM的DCFH-DA荧光探针溶液中，在37℃细胞培养箱内孵育30分钟，后用灭菌PBS洗涤三次，以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。最后用荧光显微镜观察细胞荧光强度。 本人购买的是sigma公司的DCFH-DA荧光探针粉末（2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate），DMSO配成10mM储备液，-20℃保存，实验时稀释1000倍至浓度为10uM使用。DCFH-DA(2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐)是非标记性的氧化敏感的荧光探针，DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光以判定细胞内活性氧的水平。 哪位小伙伴有做过或正在做相关试验，可以相互联系交流一下！！  图片1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
267一志愿南京工业大学0817化工求调剂
已经有7人回复
-
一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂
已经有3人回复
-
一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂
已经有4人回复
-
一志愿武理材料305分求调剂
已经有6人回复
-
材料专硕英一数二306
已经有3人回复
-
085600材料与化工调剂 324分
已经有7人回复
-
311求调剂
已经有3人回复
-
26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线
已经有7人回复
-
295求调剂
已经有5人回复
-
354求调剂
已经有5人回复
2楼2015-09-16 15:02:57
3楼2015-09-21 16:04:44
4楼2015-09-21 16:16:34
5楼2017-02-27 23:43:07
