24小时热门版块排行榜    

查看: 1017  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清萱楚豫

铁虫 (小有名气)

[求助] 5‘RACE做了大半年无果 已有1人参与

有谁做RACE的吗?我做5’RACE做了几个月了,一无所获,刚开始是不出带,后来出了一个带测序不对。现在换个引物,出了带子竟然有两条,想拿去测序,转化蓝白斑时,盘子长不出斑点了,都是糊的,重复了几次还是糊的,不晓得哪里出问题了。还有5‘RACE的引物是从3’RACE克隆出的片段里抠出来的,是不是我之前3‘RACE做的不好,导致5'RACE的引物不好,所以5’RACE才不好出带呢,各位达人们,能否给点意见或建议呢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liubolin945

铁虫 (小有名气)

朋友,我们实验室多买了一个smarter的试剂盒,想转让出去,可开发票的,
谢谢

如有打扰,实在抱歉,
QQ:277046172
3楼2015-10-27 09:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做RACE,模板质量是第一地位的,也就是你反转录前的rna是很重要的,可以考虑重新合成模板。而且要做巢式PCR,多设计几个引物,我设计了6个才弄出来,当然还得看运气,我帮师兄做了一个基因的race,还是我设计的引物,各设计了2个引物,引物回来的当天下午做了两轮PCR就把5'和3'都P出亮带了,当然第一轮无亮带,把一轮产物稀释后做二轮巢氏引物PCR后成功P出亮带,送测序也都是对的。做race的心得网上再搜搜吧~有时运气很重要,最近我的运气不是很好,做啥都很慢啊~哈哈~

发自小木虫Android客户端
让羽毛再飞一会儿
2楼2015-09-09 20:42:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Huobol at 2015-09-09 20:42:00
做RACE,模板质量是第一地位的,也就是你反转录前的rna是很重要的,可以考虑重新合成模板。而且要做巢式PCR,多设计几个引物,我设计了6个才弄出来,当然还得看运气,我帮师兄做了一个基因的race,还是我设计的引物 ...

一轮产物稀释多少倍呀

发自小木虫Android客户端
4楼2016-06-09 21:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +3 jiajunX 2026-03-22 3/150 2026-03-22 19:32 by brblmd
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +3 酥酥鱼.. 2026-03-21 3/150 2026-03-22 11:31 by 杨杨杨紫
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
信息提示
请填处理意见