| 查看: 672 | 回复: 1 | ||
取个什么名啊木虫 (正式写手)
|
[求助]
荧光定量PCR求助 已有1人参与
|
| 我用荧光定量PCR检测两个基因之间的关联，使用绝对定量的方法。现在从NCBI得到了基因的序列，怎么根据这个序列设计荧光定量PCR引物，是根据这段序列随机设计一段PCR产物为100~200bp的引物吗？设计好的引物用常规PCR摸索条件时，模板是DNA还是以RNA逆转录形成的cDNA? |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
取个什么名啊: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-11 08:55:54
感谢参与，应助指数 +1
取个什么名啊: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-09-11 08:55:54
|
PCR引物设计当然是根据你的目标序列来设计。设计的时候有两个大个问题是需要考虑的： 1. 你的PCR使用的荧光的类型：比如是使用SYBR还是使用荧光探针？这两种在特异性和费用上有各自特点，楼主可以自己了解。 2.引物的特异性、退火点、CG比例等等，一般产物长度在100-200bp，如果是使用SYBR的话，可以在网页上设计引物：http://primer3.ut.ee/ 常规PCR摸索条件时，使用DNA模板就行了。当然你不缺cDNA的话使用cDNA也可以。希望有所帮助！ |
2楼2015-09-10 08:53:48