最近这是怎么了，PCR总是有突变，啥出问题了？？？？ - 分子生物 - PCR相关

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新虫 (初入文坛)

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设计引物，定点突变。

2楼2015-09-08 20:19:31

evangelina

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:40:25

1500出一个很正常吧，刚好改了氨基酸是有点倒霉啦
你可以挑多几个菌去测序，说不定会有对的。除非突变是在PCR前几个cycle出来的。
要不就按楼上说的，做site-directed mutagenesis把它改回来。
不过假如你的酶本身就不好，这么做又有可能出现新的突变。

3楼2015-09-08 20:52:16

jeff瓜瓜

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:40:47

怎么回收片段的，如果是切胶回收的话紫外照射时间过长容易引起点突变

4楼2015-09-08 21:04:47

yangtzelv

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靠前或靠后的一般是测序问题

5楼2015-09-09 08:29:35

阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

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路过的看了一下，帮顶，祝福你好运！~~~~~~~~~~~~~~~~~~

自强不息，厚德载物；独立精神，自由思想。

6楼2015-09-09 09:03:41

huzhang01

祝福。。。

7楼2015-09-09 09:19:36

纳米之心

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祝福楼主

火星人要回火星了！！！

8楼2015-09-09 09:38:24

纳米之心

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9楼2015-09-09 09:39:38

mzhyan

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blessing

10楼2015-09-09 10:07:51