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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何提高操作的稳定性？
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yangym1123

木虫 (小有名气)

[交流] 如何提高操作的稳定性？

最近在做一个基因的组织分布，做了几次发现操作很不稳定，尽管我自己觉得都非常的小心了，可以每次做出来的结果仍然不同，内参基因都不能每次得到亮度均一的条带，请教各位大侠那方面有问题呢，怎样提高操作的稳定性呢？谢谢！
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1楼 2008-08-26 21:27:03
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):积极交流奖
RT-PCR吗？
抽提完后，定量要定准，最好开机预热30min
同时稀释的时候要稀释得准
PCR混养的时候，共有的组分不要分开每一管单独混，应该混成一个stock再分装，减少枪吸吹时的不准
循环数不要搞太高了，恰当就好~
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2楼2008-08-26 21:31:05
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qfzhang

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):积极交流奖
1 没有必要每个步骤都非常小心，明白那个是最关键的步骤
2 稀释液体的时候，如果稀释倍数非常高，比如1ul加到1ml里面，建议不要直接稀释，先做一个10倍稀释的母液
3 至于操作的标准，要看实验室有没有良好的传统和训练了， 比如如何用移液器这等小事
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3楼2008-08-27 08:38:48
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):积极交流奖
1，用同一台PCR仪
2，用同一套移液枪
3，可以用预混好的PCR　ＭＩｘ
４，每一次都自己亲自操作
５，模板要一次稀释的
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4楼2008-08-27 11:31:05
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yangym1123

木虫 (小有名气)
非常感谢各位的热心相助，谢谢！
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5楼2008-09-02 23:35:52
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