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wuyuanqing

金虫 (正式写手)

[求助] overlap后的DNA片段重组问题

各位大神,小弟在讲多个DNA片段overlap融合后进行克隆,酶切酶连,融合片段无论是处理2-3H还是过夜,连接转化后,长出的都是阴性克隆,fermentas快切酶及T4 DNA连接酶。而之前小弟在讲DNA片段扩增后克隆,阳性率很高,现在不行了。有没有大神做过这样的克隆呢?问题出在哪?谢谢!
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