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植物内生菌分离
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我是刚刚接触微生物试验,现在要做一种中药根部内生菌的分离,我做了两次都是对照长菌了,好像是表面消毒不彻底或者是试验技术不过关,我是依次用75酒精5分钟,千分之一升汞15分钟,无菌水漂洗5次,然后切片的。那位高手给指教一下,问题可能是出在哪里?这步试验的注意细节是什么?本人在此谢过了,呵呵 可惜本人只有1个金币无法致谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-7-13 at 13:49 ] |
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reasonspare
木虫 (著名写手)
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xyklmu(金币+4,VIP+0):分析的很有道理,^_^
xyklmu(金币+4,VIP+0):分析的很有道理,^_^
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错误有: 首先75% 酒精和升汞都有消毒功能 同时使用就相当于1+1=0 前者消毒,后者消毒,但是同时使用,就会有漏网之鱼。 表面消毒第一步: 消除表面张力,就是说这个步骤就是让后续的消毒处理充分接触组织。 通常用无水乙醇,或者95% 以上。1-5min 接下来,可以选择:75%乙醇15min 0.1%升汞5min 3% 过氧化氢 10min 10%次氯酸钠 15min 你选择酒精5min, 既没有达到彻底杀毒的目的,也没有达到消除表面张力的目的。 也就是说该杀死的没有死,反而给升汞留下死角, 通常升汞不超过5min,就你的protocol而言,再长的时间都有漏网之鱼。 |

8楼2008-08-27 02:47:55
raindrop8316
金虫 (正式写手)
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2楼2008-08-26 16:14:08
3楼2008-08-26 16:38:34
4楼2008-08-26 16:39:27













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