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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助了 MYB44
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时光检索

金虫 (小有名气)

[求助] 求助了 MYB44 已有2人参与

谁做过MYB44引物的pcr，p它的退火温度是多少啊，看了说明书，做了也不对，大家给点经验，谢谢啦！！
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1楼 2015-09-06 20:48:48
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
神啊，告诉我是哪个物种的好不？

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2楼2015-09-06 21:03:17
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时光检索

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-09-06 21:03:17
神啊，告诉我是哪个物种的好不？

拟南芥cdna
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3楼2015-09-06 21:15:56
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 时光检索 at 2015-09-06 21:15:56
拟南芥cdna...

有可能是引物没设计好

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4楼2015-09-06 22:40:04
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的引物是从参考文献来的还是自己设计的？
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5楼2015-09-07 11:07:32
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时光检索

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoyang123 at 2015-09-07 11:07:32
你的引物是从参考文献来的还是自己设计的？

带我的学姐给我的，告诉我大概温度，可是不对……
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6楼2015-09-07 20:01:52
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 时光检索 at 2015-09-07 20:01:52
带我的学姐给我的，告诉我大概温度，可是不对……...

你学姐如果用引物P出过正确条带,可以说明引物序列没有问题.你可以考虑三个方面,一是退火温度,做个梯度PCR,二是引物质量,是否因为保存时间长出了问题,三是你的DNA模板质量.如果有阳性对照模板,可以找出哪一个环节出了问题.
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7楼2015-09-08 12:50:27
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