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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 涂布平板出现图中现象，跪求大神指点！
汕头大学海洋科学接受调剂
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ask291314

新虫 (初入文坛)

[求助] 涂布平板出现图中现象，跪求大神指点！ 已有13人参与

本人不是学生物的，最近在做微生物实验，图中涂布的是白色念珠菌，不知为何菌落连在一起？求原因！第三张是正常的菌落形态。

涂布平板出现图中现象，跪求大神指点！
麻处（-5A）.jpg


涂布平板出现图中现象，跪求大神指点！-1
麻处（-5B）.jpg


涂布平板出现图中现象，跪求大神指点！-2
麻原（-3）.jpg
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1楼 2015-09-06 17:15:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看你的板子和稀释浓度一点关系也没有，出现这种情况原因有三：1、你倒板子的时候培养基温度太高，上盖没打开，大量的冷凝水在上盖上聚集，涂完后盖上盖子冷凝水掉下来把菌落冲散了。一般新倒的板子会出现这种问题，在冰箱放几天的不会出现。2、还有就是你培养的时候正置培养的，一般先正置培养1个小时，然后倒置培养，新倒的板子一直正置培养时间长了也会在上盖子出现冷凝水。板子倒好后不要急着收起来，在超净工作台多吹一会，2-3个小时左右。3、你涂板子的时候要涂得感觉涂棒有阻力才可以，涂得时间太短也会有这样的情况。
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15楼2015-09-08 16:20:03
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ask291314

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 黑鸭子 at 2015-09-06 18:02:15
同意楼上观点！降低稀释度 涂布均匀，，应该就不会出现了。注好运

不会吧，第三张图稀释了10的-3次，分布很均匀，前两张都稀释了10的-5次，应该不是浓度的问题吧
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5楼2015-09-06 19:52:36
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普通回帖

mcfongfong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
培养皿是不是倒过来放了？涂得太多不均匀

发自小木虫Android客户端
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fongfong好厉害
2楼2015-09-06 17:21:45
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意楼上观点！降低稀释度 涂布均匀，，应该就不会出现了。注好运
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3楼2015-09-06 18:02:15
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zhaohengheng

新虫 (小有名气)
浓度太高了

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4楼2015-09-06 19:26:09
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crb123000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.稀释倍数越大数量不可能越多，估计是每次涂布前，涂布器没消毒。
2.吸取的稀释液是0.1ml，吸取多了会造成菌落黏连。
3.需注意，控制不受平板的冷凝水污染

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6楼2015-09-06 20:09:04
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博学善思

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉不是浓度高就是吸取的菌液太多。实在不行，建议划线分离后挑单菌落活化后重新稀释涂布

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新浪微博：博学善思work
7楼2015-09-06 20:35:12
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域野（李）

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就像你说的一样，不是学生物的最近开始做试验，新手或多或少会出现这种情况，做多了就不会了。有可能不是稀释倍数的问题，建议倒平板的时候培养基尽量温度降到40——50摄氏度左右再倒，这样平板表面和盖子上不会有冷凝水，冷凝水多了会出现你第二个平板上面的情况，最好的办法是第一天做平板 用无菌报纸包好，放在烘箱里烘干，第二天再使用，测数。另外无菌操作非常重要，新手往往不容易注意到无菌操作里面的细节问题容易污染。
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8楼2015-09-07 11:47:53
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by ask291314 at 2015-09-06 19:52:36
不会吧，第三张图稀释了10的-3次，分布很均匀，前两张都稀释了10的-5次，应该不是浓度的问题吧...

从长出的菌落来分析，第三个确实长出来的多
因此：1、对于新手，可能把稀释梯度溶液自己弄混了；
2、涂布棒未做清洁，直接涂布；涂布的时候 是先高稀释度，逐渐低稀释度
3、平板里面有冷凝水，平板正置培养

建议从新做次  试试   祝好运！
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9楼2015-09-07 11:58:26
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凯乐傲君

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 黑鸭子 at 2015-09-07 11:58:26
从长出的菌落来分析，第三个确实长出来的多
因此：1、对于新手，可能把稀释梯度溶液自己弄混了；
2、涂布棒未做清洁，直接涂布；涂布的时候 是先高稀释度，逐渐低稀释度
3、平板里面有冷凝水，平板正置培养

...

涂布后 超净工作台内开风 吹干试试  我以前有过类似现象
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10楼2015-09-07 17:16:52
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