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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 分离提纯
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Knight186

新虫 (初入文坛)

[交流] 分离提纯 已有2人参与

凝胶过滤层析的原理，总感觉难理解，求解释

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1楼 2015-09-05 21:43:10
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)
★
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哈？你是指分子筛蛋白纯化技术吗？
其原理是应用蛋白质分子量或分子形状的差异来分离。当样品从色谱柱的顶端向下运动时，大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒从而被迅速洗脱；而较小的蛋白质分子能够进入凝胶颗粒中，且进入凝胶的蛋白在凝胶中保留时间也不同，分子量越大，流出时间就越早，最终分离分子大小不同的蛋白质。
这有一篇文章，介绍的挺详细的，你可以看看：http://www.detaibio.com/topics/gel-filtration-chromatography.html
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
2楼2015-09-06 09:28:40
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hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
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这有什么难理解的啊，混合液进入凝胶床，大分子不进入凝胶颗粒内部，通过颗粒空隙直接流出，小分子进入凝胶分子内部，后流出。中间分子大小的，有部分进入凝胶颗粒内部所以中间流出。经过的路径和受到的阻力不一样，就分开了啊，分子量越小走过的路径越复杂，受到的阻力越大，所以越小保留时间越长，越往后流出。祝顺利。有问题加QQ514099167交流。
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3楼2015-09-06 10:56:45
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Knight186

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-09-06 09:28:40
哈？你是指分子筛蛋白纯化技术吗？
其原理是应用蛋白质分子量或分子形状的差异来分离。当样品从色谱柱的顶端向下运动时，大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒从而被迅速洗脱；而较小的蛋白质分子能够进入凝胶颗粒中，且 ...

大的分子能通过，迅速被洗脱下来，小分子也有很大一部分从缝隙迅速通过被洗脱下来啊！为什么噢？

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4楼2015-09-08 11:14:07
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Knight186

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-06 10:56:45
这有什么难理解的啊，混合液进入凝胶床，大分子不进入凝胶颗粒内部，通过颗粒空隙直接流出，小分子进入凝胶分子内部，后流出。中间分子大小的，有部分进入凝胶颗粒内部所以中间流出。经过的路径和受到的阻力不一样， ...

空隙大，大分子能通过，小分子应该更容易通过啊？

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5楼2015-09-08 11:16:38
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by Knight186 at 2015-09-08 11:14:07
大的分子能通过，迅速被洗脱下来，小分子也有很大一部分从缝隙迅速通过被洗脱下来啊！为什么噢？
...

分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内，而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长。
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早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
6楼2015-09-09 09:32:37
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