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longyi706565

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by tuzilanlan at 2015-09-06 14:04:28
我查了很多英文、中文的文献,里面用乙腈-水体系的很多的,选择乙腈的流动相应该没有问题吧。你是做什么化合物的呢,方法能不能大概描述一下,多谢啦~...

乙腈-水体系并不是适合所有化合物,而且是很多都不适合。
很多时候加了缓冲盐后,峰型会差别很多,我也不能打包票说一定可以,但不试试怎么就不知道不可以??如果不行的话再筛选下pH、色谱柱之类等。
做方法本身就是一个不断尝试的过程。
若不建议,给张图看看。
11楼2015-09-06 14:24:07
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tuzilanlan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by longyi706565 at 2015-09-06 14:24:07
乙腈-水体系并不是适合所有化合物,而且是很多都不适合。
很多时候加了缓冲盐后,峰型会差别很多,我也不能打包票说一定可以,但不试试怎么就不知道不可以??如果不行的话再筛选下pH、色谱柱之类等。
做方法本身 ...

我做了两个流动相比例,乙腈:水=70:30和60:40 ,拖尾都挺严重的
液相,流动相是乙腈,峰拖尾怎么解决
1.png

12楼2015-09-06 19:27:50
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znn418215823

金虫 (小有名气)

加三氟乙酸!我做多肽是加这个的!挺‘好使的

发自小木虫Android客户端
岁月不堪数
13楼2015-09-06 19:51:51
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chenenli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你分析的物质呈酸性,拖尾的原因可能是酸性物质吸附在硅胶上,可以往流动相中加入0.1%的TFA,或者增加流动相的离子强度,通常是25~50mM的乙酸铵溶液。硅胶键合的反相柱能承受的pH是2.5~7.5,pH太高,键合相会被破坏,太低硅胶会溶解,所以只要控制好pH柱子是不会坏的。

[ 发自小木虫客户端 ]
14楼2015-09-06 20:23:01
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tuzilanlan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by znn418215823 at 2015-09-06 19:51:51
加三氟乙酸!我做多肽是加这个的!挺‘好使的

那你加的是色谱纯还是化学纯呢?
15楼2015-09-10 20:57:40
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zhouchunjuan

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们做过类似的化合物,用的是普通的C-18柱子,用甲醇/水体系,峰形挺好看的,不妨试一下。但有时候会有一些类似的化合物用中性的体系峰形确实挺不好看,实在不行的可以试下酸性或碱性缓冲盐。
16楼2015-09-11 10:20:58
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