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请求大神帮忙分析目的蛋白的表达含量! 已有1人参与
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hc-material
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【答案】应助回帖
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1270853789: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-06 15:16:24
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1270853789: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-06 15:16:24
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1.电泳跑的有点差哦,可以少上点样跑电泳,用你现在上样的3分之一,差不多了。你的目的蛋白时那一条。直接看是不出来时多少的。 2.先用BCA测总蛋白量,在用gel analyzer算电泳条带中目的蛋白体积占总体积的比例,在计算的表达量。虽然得到一个数据,但基本没任何意义,是发文章忽悠人用。 3,建议你用多少mg目标蛋白/克湿菌体或ml培养液,方式表达。 只以目标蛋白为主体,不要管其它蛋白。 4.若扔需要用gel analyzer软件分析体积比,自己下个软件,先找个图片练练手,应该半个小时你就知道怎么用了,很简单的。然后在测你的总蛋白,然后就计算,很简单,虽然这种方法是自娱自乐,没有什么意义,若坚持这样做就可以。 5.以单位菌体或培养液中目的蛋白的表达质量为描述方式,难度比较大,直接能在混合液中对你的目标蛋白进行定量。若不行,还需将目的蛋白先和其它蛋白分离。 祝顺利。 |
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2楼2015-09-05 21:30:17

3楼2015-09-06 15:07:51











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