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1270853789

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请求大神帮忙分析目的蛋白的表达含量! 已有1人参与

这是我做的电泳图,目的蛋白是从上往下看的第一条带,第十个泳道是对照组,我自己下载了蛋白质含量分析的软件,可是不会用啊,请求帮忙

请求大神帮忙分析目的蛋白的表达含量!
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勤能补拙是良训,一分辛苦一分才
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1270853789: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-06 15:16:24
1.电泳跑的有点差哦,可以少上点样跑电泳,用你现在上样的3分之一,差不多了。你的目的蛋白时那一条。直接看是不出来时多少的。
2.先用BCA测总蛋白量,在用gel  analyzer算电泳条带中目的蛋白体积占总体积的比例,在计算的表达量。虽然得到一个数据,但基本没任何意义,是发文章忽悠人用。
3,建议你用多少mg目标蛋白/克湿菌体或ml培养液,方式表达。 只以目标蛋白为主体,不要管其它蛋白。
4.若扔需要用gel  analyzer软件分析体积比,自己下个软件,先找个图片练练手,应该半个小时你就知道怎么用了,很简单的。然后在测你的总蛋白,然后就计算,很简单,虽然这种方法是自娱自乐,没有什么意义,若坚持这样做就可以。
5.以单位菌体或培养液中目的蛋白的表达质量为描述方式,难度比较大,直接能在混合液中对你的目标蛋白进行定量。若不行,还需将目的蛋白先和其它蛋白分离。

祝顺利。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-09-05 21:30:17
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1270853789

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-05 21:30:17
1.电泳跑的有点差哦,可以少上点样跑电泳,用你现在上样的3分之一,差不多了。你的目的蛋白时那一条。直接看是不出来时多少的。
2.先用BCA测总蛋白量,在用gel  analyzer算电泳条带中目的蛋白体积占总体积的比例, ...

谢谢你的回复,很有用。
勤能补拙是良训,一分辛苦一分才
3楼2015-09-06 15:07:51
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