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新虫 (初入文坛)

[求助] ISSR-PCR后，泳道不清晰，胶孔亮，麻烦各位大侠帮我看看，第一次发帖，谢谢各位啦！

中间是MARKER,两侧分别是两个引物的梯度退火。。。很着急！老是做不好不知道问题出在哪里了，这还是比较好的PCR结果呢，还有其他的问题~

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附件 1 : Administrator_2015-08-13_20_小时_07_分钟.tif

2015-09-04 16:48:58, 1.52 M

1楼 2015-09-04 16:52:09

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新虫 (初入文坛)

引用回帖:

2楼: Originally posted by jl.liu at 2015-09-04 20:08:01
不太懂，左边的特异性有点强，右边的糊，再摸摸反应条件吧

谢谢你的回复，我本来是要筛选引物的，现在这两个是参考同类物种的两个引物，想针对我的物种再优化下退火温度，结果跑成这样，我是需要再重新设定退火温度吗，还是PCR中各种物质加的量（这个之前已经摸好了，后来换成用2*Es Taq MasterMix 了，应该没有问题吧）？

3楼2015-09-05 08:45:52

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新虫 (初入文坛)

不太懂，左边的特异性有点强，右边的糊，再摸摸反应条件吧

2楼2015-09-04 20:08:01

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