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liyd19831121金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助】5-羟甲基糠醛的测定方法
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我自己合成的聚葡萄糖，要测其5-羟甲基糠醛的含量，在篇资料上看到在283nm下用蒸馏水做空白试验，测吸光值就可以用一公式算出，我按这方法怎么吸光度是负值哦? [ Last edited by sugl on 2009-4-1 at 21:27 ] |
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1.仪器与试剂： 1.1仪器 紫外分光光度计，测定284nm和336nm处的吸光度A值 1.2试剂 （1）Carrez溶液Ⅰ：用水溶解15gK4Fe(CN)6•3H2O,定容于100ml。 （2）Carrez溶液Ⅱ：用水溶解30g Zn(Ac)2•2H2O,并定容至100ml。 （3）NaHSO3溶液：0.20%。用水溶解0.20g NaHSO3，并稀释至100ml。必要时可按1+1稀释。每天新配制。 2.试验过程 准确称取约5g糖浆到一个小烧杯中，用25ml纯水分次转移至50ml容量瓶中。用1000ul微量进样器吸取500ul Carrez溶液Ⅰ于容量瓶中，充分混匀。将微量进样器用纯水清洗干净，吸取500ul Carrez溶液Ⅱ于容量瓶中,充分混匀。用水稀释到刻度。可滴几滴乙醇防止起泡。用中速定性滤纸过滤样液，用前10ml样液洗涤滤纸，用滤液洗涤收集滤液用烧杯。弃去前10ml滤液。 向两支25ml比色管中分别加入5ml滤液。向其中一支比色管中加入5ml水作为样液，另一支加入5ml 0.20% NaHSO3溶液作为参照液。将两支比色管充分混匀。 以加入NaHSO3溶液的比色管为参照，用1×1cm比色皿分别测定样液在284nm和336nm处的吸光度A值。若A>0.6用水稀释样品。用0.1% NaHSO3溶液稀释参照液。 3.计算 甲基糠醛(HMF)(mg/kg)=(A284-A336)×149.7×5/样重(g) 因子=149.7=(126/16.830)(1000①/1000②)(1000③/5) 其中126为HMF的分子量；16.830为HMF在284nm处的摩尔吸光度系数；1000①=mg/g;1000②=ml/l;1000③=报告的糖浆克数；5=样品重量。 |
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