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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC流动相中水比例较高时,必须选用耐水的色谱柱吗? 已有4人参与

使用HPLC检测柠檬酸,有机酸极性较大,流动相中水的比例又比较高,看到有的文献中说道这种情况下色谱柱容易疏水塌陷,因此要选用较耐水的色谱柱。但是实验室的是Ultimate XB-C18柱,属于常规柱和对强碱性化合物有较好分离效果的柱子,可以在流动相中水比例较高的情况下拿来分离检测柠檬酸吗?求大神告知。
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copeal

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lenka.ctt at 2015-09-01 09:49:38
再麻烦您解答一下,”寻找合适的比例“,是怎么来确定呢?...

上仪器,看色谱峰形状,分离度和保留时间,这些符合要求就可以了。柠檬酸用C18柱可以分离,估计30%的甲醇差不多。

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12楼2015-09-02 13:25:25
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copeal

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lenka.ctt: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-01 18:39:42
有机相大于5%基本上就不会发生疏水塌陷了。

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2楼2015-08-31 19:07:14
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lenka.ctt

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by copeal at 2015-08-31 19:07:14
有机相大于5%基本上就不会发生疏水塌陷了。

文献中大部分用的是PH2.8的Na2HPO4水溶液做流动相,可以配成5%的甲醇来做吗?
3楼2015-09-01 08:54:26
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copeal

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lenka.ctt at 2015-09-01 08:54:26
文献中大部分用的是PH2.8的Na2HPO4水溶液做流动相,可以配成5%的甲醇来做吗?...

PH2.8的Na2HPO4水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,利用液相仪的泵进行配比,寻找合适的比例。B即为有机相,它的比例大于5%即不用担心疏水塌陷的问题。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-01 09:02:52
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