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已知一个天然产物，如何寻找它的作用靶点 已有2人参与
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| 已经知道一个天然产物，有很强的细胞毒性(nM水平)，如何寻找它的作用靶点？有什么策略或者好的方法，求各位有经验的虫友给些建议～～感谢！！ |
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gxzhou
木虫 (正式写手)
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- 专业: 中药抗炎与免疫药理
2楼2015-09-01 06:45:26
3楼2015-09-01 07:50:00
4楼2015-09-01 09:33:41
5楼2015-09-01 12:03:09
6楼2015-09-01 14:19:59
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。 其基本原理是将靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶）融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白,“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。此方法简单易行,操作方便。 GST pull-down技术 GST：谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase) |
7楼2015-09-01 19:42:51
8楼2015-09-01 19:45:09
9楼2015-09-02 09:29:06
10楼2015-09-02 09:58:24