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zliean

金虫 (小有名气)

[求助] pcr拖尾 已有2人参与

pcr相同条件 原本可以p出目的条带  后来就变成拖尾了 条件都没变  图片是剃度pcr  求教什么原因

pcr拖尾


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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zliean: 金币+2 2015-09-03 14:28:03
下面亮亮的是引物二聚体吧,基本上引物都没怎么被消耗,引物少一点试试
2楼2015-08-31 14:24:57
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zliean: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-09-03 14:27:56
引物二聚体挺多,先看看资料吧,http://www.detaibio.com/topics/pcr-faq-specific-amplify.html关于PCR问题解析和提高PCR扩增特异性的方法的方法,建议你使用热启动酶扩增,能够抑制二聚体产生,拖尾的原因很多啊,注意你的模板没有降解,酶没有失活,注意操作普通酶冰上操作,热启动型的室温配置体系即可
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-09-01 10:04:00
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