| 查看: 1429 | 回复: 3 | |||
[求助]
腹水硫酸铵沉淀后上proteinG 柱子需要透析除盐吗？ 已有2人参与
|
|
问一下，腹水硫酸铵纯化大家都用的什么方法呢？看到有除盐的也有不除盐的，向后面再接着用rotein G的柱子纯化，是不是不需要硫酸铵这一步呢？ 这个方法怎么样，也是从网上看到的 1. 待提取样品经4℃或室温离心13 000r/min(20000×g)，30min，收集上清； 2. 取上清约20ml与等体积生理盐水混合后，于搅拌下缓慢滴加40ml SAS，于4℃沉淀30min以上或过夜，使蛋白充分沉淀。 3. 13 000r/min，10min 4℃离心，弃上清。 4. 用12ml生理盐水溶解沉淀，同步骤（2）滴加8ml SAS，4℃1h。 5. 重复步骤（3）离心，用13.3ml生理盐水溶解沉淀， 6. 滴加6.6ml SAS，4℃1h； 7. 重复步骤（4）离心后所得沉淀物用少许盐水溶解沉淀，并装入透析袋。 8. 用大于20倍体积的PBS于4℃透析，更换透析液数次，可置-20℃保存或进一步纯化。 |
回复此楼» 猜你喜欢
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有5人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有17人回复
-
纳米粒子粒径的测量
已经有8人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
-
计算机、0854电子信息（085401-058412）调剂
已经有5人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有5人回复
-
溴的反应液脱色
已经有7人回复
-
推荐一本书
已经有12人回复
-
基金申报
已经有4人回复
-
常年博士招收(双一流，工科)
已经有4人回复
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
2楼2015-08-30 22:42:29
3楼2015-09-04 10:36:10
4楼2015-09-24 16:51:49