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尐然不同

新虫 (小有名气)

[求助] 细柱子保留时间太短问题,如何选择好的梯度洗脱?(有色谱图) 已有4人参与

用的是Sepax BR-C18 2.1*150mm 3um的细柱子,分离物质的logP都很小(如下图),导致保留时间极短,而且没有办法分开,样品用甲醇溶解的,流动相用的也是甲醇和水,第一张色谱图的梯度是甲醇的比例0-10min,50%-60%;10-20min,60%-100%; 20-35min, 100%.
问题如下,求各位大神帮助!
1.细柱子虽然柱压确实高,不过这里用50%甲醇为流动相时柱压接近25MPa, 就算柱子受得了仪器也受不了了
2.前面的物质logP较小,难以分开,而且进单样的时候(有机相比例较低60%-80%),柱效也很低,大概4000左右,不知道如何能够提高前面物质的柱效,并实现良好分离
3.后面的物质需要在纯有机相的条件下冲洗出来,如何能够较合理的设置梯度洗脱,在保证物质完全分离的情况下,缩短中间时间
4.后期还是打算为了柱压和峰形考虑,换成乙腈为流动相,那样洗脱能力更强,样品溶解是不是也得更改溶剂?有机相比例还需要降低?
求助各位大神,谢谢!

细柱子保留时间太短问题,如何选择好的梯度洗脱?(有色谱图)
PAEs.png


细柱子保留时间太短问题,如何选择好的梯度洗脱?(有色谱图)-1
8 methanol tidu5-10 0.3 01.png


细柱子保留时间太短问题,如何选择好的梯度洗脱?(有色谱图)-2
8 methanol tidu6-10 0.3 01.png
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xmin828

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LZ,柱子细不细(一般我们指内径)其实不会非常影响保留时间,你这个柱子内径窄,但是填料粒径小,所以其实resolution很高,理论上短柱的分离效果确实比长柱要高,但你这根柱子对于你这个粒径来说是可以的,我很少看到3 um的柱子能上250mm(你这不是核壳型填料吧)
对于LZ这个问题我的建议是换柱子,一般情况下在C18柱中乙腈的洗脱能力比甲醇还要强,你本来就觉得保留时间短了,还改用乙腈?可以尝试使用普通苯基柱
色谱条件摸索是一个漫长的过程,祝好运!
6楼2015-08-31 14:00:15
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hopestarzyf

铜虫 (小有名气)

塑化剂也可以用液相检测?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-08-29 20:41:58
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尐然不同

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hopestarzyf at 2015-08-29 20:41:58
塑化剂也可以用液相检测?

可以啊,为什么不行?
3楼2015-08-30 10:52:00
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jh9689

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是色谱条件的原因,可认偿试流动相加缓冲盐调一下pH值。另外注意检查一下系统的死体和积。

发自小木虫Android客户端
做分析的,大家多交流
4楼2015-08-30 16:30:11
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