| 查看: 577 | 回复: 2 | |||
Snow_amy新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于WB条件改进的问题 已有1人参与
|
|
我用的材料是细菌，抗体是让公司免疫兔子得到的，这个抗体用纯化的蛋白去做是可以工作的，但是我用我的菌去做得不到目的条带，而且有很多杂带，如果用这个基因过表达的菌去做就可以得到想要的条带，一抗我是用的1:1000的稀释比例，如果我把一抗浓度用到1:500，只能是杂带更多更亮，在野生型中依旧没有目的条带。应该是在野生型中量比较低，求助各位大侠，看看能怎么改变一下！多谢多谢！ 从左往右依次的野生型菌，目的基因敲除的菌株，目的基因过表达的菌株，和GST标记的目的基因。  结果 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有71人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
acvhreinlg
银虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 230.4
- 散金: 1800
- 红花: 7
- 帖子: 891
- 在线: 269.9小时
- 虫号: 1896747
- 注册: 2012-07-17
- 性别: GG
- 专业: 细胞物质运输
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Snow_amy: 金币+5, ★有帮助 2015-08-31 15:07:38
感谢参与，应助指数 +1
Snow_amy: 金币+5, ★有帮助 2015-08-31 15:07:38
|
虽然我不是做微生物的，谈点看法，单个细菌的蛋白表达量低很正常，过表达某一蛋白常常会抑制其他的蛋白，我觉得可能蛋白样品处理上要想想办法，用抗体加beeds抓取目的蛋白等办法，还要要看看这个蛋白原先是胞内的还是膜蛋白还是分泌蛋白。western结果有问题我认为常常是样品的问题。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-08-30 13:23:00
Snow_amy
新虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 52
- 散金: 5
- 帖子: 12
- 在线: 10.8小时
- 虫号: 1999899
- 注册: 2012-09-14
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2015-08-31 15:07:41
