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匿名

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Bonarven

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1楼 2015-08-29 10:46:01
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)
★
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你用的什么牌子的酶,换一下NEB的酶,切24h都没有问题,效果很好滴！

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8楼2015-08-29 18:32:36
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疯子J-F

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-29 22:57:21
要切这么久么！我做回收连载体也就切3小时，酶的星活性，切太久就把质粒切碎了！看你的单酶切都不止一个条带的。

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2楼2015-08-29 12:23:38
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Bonarven

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-29 22:57:35
质粒可能被污染了 也可能是你在配液的时候把酶混进去了 可以把原质粒单独跑胶 和marker 还有你质粒的图谱对比一下

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umaledecissionanduvetolivewiththeconcequnces
3楼2015-08-29 12:55:59
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枭翔

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-31 23:11:47
我觉得质粒没啥问题，问题在于第一你要切的质粒，是不是只有一个酶A和B位点？如果是的话，减少酶切时间，1楼说的对，酶切时间太长，会出现星活性。我尝试过酶切1.5h，结果都不错。
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4楼2015-08-29 16:00:11
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