| 查看: 642 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
有关总RNA提取问题请教大家哦！！
|
|||
|
我是第一次做提取总RNA实验做RT-PCR，但是感觉结果总是不理想。 首先，我的吸头和离心管都是进口的，而且我还经过DEPC处理过后高温高压没菌，其次是提取后乙醇沉淀后可以清楚看到离心管底部有淡淡白白的东西，为了不被基因组污染我还尽量只吸到三层中的上层透明液体。 其次我怕是反转录试剂盒有问题，又换了一个新的，可是反转录第一条CDNA后，结果跑胶发现带很不明亮，比少量标准DNA还淡很多。 然后我用自己的引物去PCR拉目的基因，PCR形成的总是引物多聚体带。 现在我正在找个内参引物，但是cDNA带不亮问题怎么去解决啊？我怀疑是不是EB不能很好地插入单条CDNA链而使反转录第一条CDNA跑胶不亮。 总之，提取总RNA后反转录第一条CDNA后为什么跑胶带不亮？？、？？ 谢谢哦！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有6人回复
-
延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有23人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
3楼2008-08-23 18:29:34
figo.339
木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 14343.3
- 散金: 400
- 帖子: 1753
- 在线: 164.1小时
- 虫号: 467945
- 注册: 2007-11-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2008-08-23 18:16:56
4楼2008-08-23 18:32:52
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
5楼2008-08-23 19:43:33
