应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量问题
51/1返回列表
查看: 455  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

pqq226

铜虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量问题

新手一枚，刚做荧光定量几次，绝对定量分析，相关系数R2偏低，扩增效率很高，求人指点怎么回事
回复此楼

» 猜你喜欢
开心最重要
1楼 2015-08-28 12:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pqq226

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by claire8168 at 2015-08-28 16:07:38
最好把具体的结果贴上来，这样比较好分析。

R2一般<0.97 这个标准曲线就是不可信了，如果是你稀释的标准品，那是不是稀释的时候加样不准确，没有充分混匀，如果是现成的标准品，有没有充分融化混匀后使用。
...

R2一般都会大于0.98，但是扩增效率真的是非常高150%，我用的是TaKaRa试剂盒，引物和探针的设计应该不会有问题，都是参考标准做的，用的是探针法，我是用的质粒做的荧光定量，质粒是自己提的
赞一下 回复此楼
开心最重要
3楼2015-08-29 11:00:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

claire8168

铁虫 (初入文坛)
最好把具体的结果贴上来，这样比较好分析。

R2一般<0.97 这个标准曲线就是不可信了，如果是你稀释的标准品，那是不是稀释的时候加样不准确，没有充分混匀，如果是现成的标准品，有没有充分融化混匀后使用。

扩增效率一般在95%~105%之间都是可以的，约接近100%越好。你的扩增效率具体有多高？ 扩增效率一般反映出的是体系的问题，自配的体系还是试剂盒里配好的buffer？还有不知道你是用的染料法还是探针法，具体的引物和探针的设计是不是有问题？大概能想到这么多。希望能帮到你。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

pqq226
2楼2015-08-28 16:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +5 苏东坡二世 2026-08-23 5/250 2026-08-27 10:39 by 炜雨
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭