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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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东邪2005

金虫 (小有名气)

大木虫

[交流] 请问下列操作对吗？

请问下列操作对吗？尤其是划横线部分
1.MZ对照品储备液的制备：称取MZ对照品约8. 0mg，精密称定，加分析甲醇溶解，转移至100mL容量瓶中，定容刻度，即得80000μg•L-1的储备母液。于冰箱4℃保存备用；
2.取1液1mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得8000μg•L-1的稀释液；
3.取2液1mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得800μg•L-1的稀释液；
4.取3液5mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得400μg•L-1的稀释液；
5.取4液5mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得200μg•L-1的稀释液；
6.取5液5mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得100μg•L-1的稀释液；
7.取6液5mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得50μg•L-1的稀释液；
8.取7液5mL至10mL容量瓶中，分析甲醇定容，得25μg•L-1的稀释液；
取空白血浆0.5mL，各加入8、7、6、5、4、3不同浓度的MZ稀释液0.5mL，震荡混匀，使血浆中药物浓度相当于25.0，50.0，100.0，200.0，400.0，800.0μg•L-1，然后按“血浆样品处理方案”处理。经HPLC分析，以测得MZ 峰面积(A)作横坐标，以血浆MZ浓度(C)为纵坐标，得到25.0~800.0μg•L-1范围的血浆MZ 浓度标准曲线。
血浆样品处理方案：取0.5mL含药血浆加至2mL具塞锥形离心管中，漩涡震荡1min，加入乙酸乙酯1mL，漩涡震荡2min，4000rpm离心10min，取上层提取液置于一干燥尖底试管中，离心管中再加入1mL乙酸乙酯，同法操作。震荡混合两次的提取液，30℃水浴氮气吹干，残渣用50μL流动相复溶后，4000rpm离心10min，取上清液10μL进样。
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----东邪黄岛主
1楼 2008-08-22 22:06:22
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lmjyliu0517

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复！
个人认为,空白血浆也有体积,应该是稀释一倍了,12.5.,25,50.以此类推
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2楼2008-08-23 08:57:39
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东邪2005

金虫 (小有名气)

大木虫
按照2楼的说法.不应该稀释而应该浓缩才对啊!
有搞体内药分的高人指点一下撒.....急用呢
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----东邪黄岛主
3楼2008-08-23 17:03:40
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kkbyb

木虫 (著名写手)
★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):3Q
楼主正确，放心做吧。2楼的说的意思我明白，但这是体内分析的做法。注意名词解释

取空白血浆0.5mL，各加入8、7、6、5、4、3不同浓度的MZ稀释液0.5mL，震荡混匀

血浆浓度：25.0，50.0，100.0，200.0，400.0，800.0μg•L-1。

分析液浓度：12.5，25.0，50.0，100.0，200.0，400.00μg•L-1。
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4楼2008-08-31 21:12:58
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清水兰

铜虫 (初入文坛)
★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):3Q
楼主，表面看你的做法是对的，但是有点与你不同之处是，你取的是0.5mL含药血浆，那么你的血浆中药物浓度都应该相应减半了。
原因：原本0.5ml空白血浆+0.5ml标液，此时含药血浆总体积为1ml 。
还有你的做法不是很科学，一般加标液体积都是以几十μl来算的，当加入标液体积相对血浆体积很小时，你的算法可以认为是对的。
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5楼2008-08-31 22:36:41
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sinoyxh

呵呵，提个小问题，误差是会累积的，楼主稀释如此多道，不知累积的误差会有多大啊，而且溶液2 基本上没用：取1溶液1ml到100ml就可以直接得到3啊，在我们化药来说稀释步骤一般不超过3步呵呵
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6楼2008-09-01 09:11:24
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kkbyb

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by sinoyxh at 2008-9-1 09:11:
呵呵，提个小问题，误差是会累积的，楼主稀释如此多道，不知累积的误差会有多大啊，而且溶液2 基本上没用：取1溶液1ml到100ml就可以直接得到3啊，在我们化药来说稀释步骤一般不超过3步呵呵

说得有道理，我开始没太注意他这个问题。确实，标线系列浓度最好从一个储备液稀释得到，但因为体内分析标线范围宽，可能达到几十到几百倍，势必造成一根移液管不能满足的情况，这时一些低浓度点可以由同一个合适的中间浓度稀释得到。
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7楼2008-10-01 18:24:42
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kkbyb

木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！
引用回帖:
Originally posted by 清水兰 at 2008-8-31 22:36:
楼主，表面看你的做法是对的，但是有点与你不同之处是，你取的是0.5mL含药血浆，那么你的血浆中药物浓度都应该相应减半了。
原因：原本0.5ml空白血浆+0.5ml标液，此时含药血浆总体积为1ml 。
还有你的做法不是很 ...

不知道楼主对这位朋友的说法注意没？虽说他没理解血浆浓度的定义，但他提醒了我一件事，就是在做方法学是在空白血浆中加入一定体积的标准溶液，而实际样品本身是含药的，不需要加标准溶液，但应该平行操作加入同体积的标准溶液的空白溶剂。
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8楼2008-10-01 18:28:59
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yangsitao

铁虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论！
楼主，你这的做法是对的，只不过你在制备的血浆样品中加入与制备工作曲线相同的空白血浆后才能进样HPLC，因为加样时应该平行操作。
二楼说的也对这种在稀释中是要考虑的，但是你在对所用物质进行HPLC时都相当于是每次进样的过程中都引入了0.5的校正因子。这对咱们的测量没影响。
在  A对照：A样品 = 0.5*C对照：0.5*C样品  中0.5系数不就相抵消了。所以在对照品的工作曲线上也能找到你样品对应的点。只要不超出你的25.0~800.0μg•L-1。
希望我的帮助对你有用。
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卖身，不卖肉。
9楼2008-10-03 20:11:25
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Eleanor

木虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
你在做实际样品分析时，应该加入相应的0.5 ml的甲醇来补偿标准系列溶液的体积，此外，按照FDA标准，标准系列溶液应该配制在血浆里。

至于血浆浓度的计算是正确的，稀释溶液确实欠妥，应该尽量减少累积误差。
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10楼2008-10-07 21:08:32
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