24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1804  |  回复: 16

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-11-06 16:02:40
我也是做毕赤酵母Ppic 9K的表达。不知道你现在做的怎么样了?
表达手册上有MUTS的生长描述MM培养基上处于对数期MUT+的倍增时间为4-6小时
muts为18小时
另外,菌种不同时间也有差异。

你好!我还没表达出来!我快烦死了!就是按着人家论文里面的诱导方法进行诱导的!跑蛋白用银染显示可能有条带,然后用镍住纯化之后就没有蛋白了,用his标签的抗体做wb也没有!不知道问题出在哪里了,之前测序结果表明片段已经正确连上去了啊……毕业不能啊

发自小木虫IOS客户端
11楼2015-11-13 11:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by uranuser at 2015-11-13 09:53:52
就应该是一个条带吧?因为你已经把目的片段转入了基因组,在组氨酸平板上长出的就是含有目的基因的菌。
另外,Muts型慢也不要紧,关键是表达量,如果Muts型表达量比Mut+型高,那就用Muts型

你好!请问你也是做9k表达的吗?我看了文献说mut+表型的是有两条条带的,所以我现在怀疑是不是我9k质粒上的aox1这个启动子被破坏了,所以很难诱导出蛋白来,好烦恼!

发自小木虫IOS客户端
12楼2015-11-13 11:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-11-06 16:02:40
我也是做毕赤酵母Ppic 9K的表达。不知道你现在做的怎么样了?
表达手册上有MUTS的生长描述MM培养基上处于对数期MUT+的倍增时间为4-6小时
muts为18小时
另外,菌种不同时间也有差异。

谢谢

发自小木虫IOS客户端
13楼2015-11-13 11:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by uranuser at 2015-11-13 09:53:52
就应该是一个条带吧?因为你已经把目的片段转入了基因组,在组氨酸平板上长出的就是含有目的基因的菌。
另外,Muts型慢也不要紧,关键是表达量,如果Muts型表达量比Mut+型高,那就用Muts型

谢谢

发自小木虫IOS客户端
14楼2015-11-13 11:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 肉肉肉. at 2015-11-13 11:05:08
你好!请问你也是做9k表达的吗?我看了文献说mut+表型的是有两条条带的,所以我现在怀疑是不是我9k质粒上的aox1这个启动子被破坏了,所以很难诱导出蛋白来,好烦恼!
...

我现在也做9k。
得更正一下说法,我前面可能是弄错了,根据毕赤酵母手册还有文献,应该是有两条条带。既然你怀疑你的AOX1启动子被破坏了,那就重新换过在试吧。
另外,表达的话,根据其他虫友的说法,也许换换如温度或pH等条件会有所不同。
15楼2015-11-18 20:17:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

思密达佳

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-11-06 16:02:40
我也是做毕赤酵母Ppic 9K的表达。不知道你现在做的怎么样了?
表达手册上有MUTS的生长描述MM培养基上处于对数期MUT+的倍增时间为4-6小时
muts为18小时
另外,菌种不同时间也有差异。

请问你用的是什么试剂盒呢?

发自小木虫Android客户端
16楼2015-11-26 09:19:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 思密达佳 at 2015-11-26 09:19:48
请问你用的是什么试剂盒呢?
...

你指的是什么用的试剂盒呢?最近课多都没怎么做实验.........唉我好颓废....
17楼2015-11-26 16:00:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 肉肉肉. 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +7 nnnnnnn5 2026-03-25 7/350 2026-03-29 00:32 by 我是小康
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-28 3/150 2026-03-28 23:58 by wxiongid
[考研] 材料学硕333求调剂 +10 北道巷 2026-03-24 10/500 2026-03-28 23:06 by 无际的草原
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +5 举个栗子oi 2026-03-24 6/300 2026-03-28 23:03 by lizhi8172
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 5/250 2026-03-28 21:26 by zhq0425
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 312,生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-24 4/200 2026-03-28 13:17 by 唐沐儿
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +7 麻辣鱿鱼 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:17 by zllcz
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
请填处理意见