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酒家何处

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【答案】应助回帖

我们一直用mbi的酶。看起来按u算比nebtakara贵好多

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11楼2015-09-11 13:13:40

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yigeerliu

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【答案】应助回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by 吗子 at 2015-09-11 11:22:56
我换了NEB的T4酶，结果还是和以前一样，没有连接上呢。你的是什么情况？可以说出来大家一起讨论哈...

我第一次做的时候，只长了一个菌，然后酶切、PCR都对，去测序，目的蛋白也没问题，但是后来发现载体突变，所以失败。
第二次长了很多很多，但是都是假阳性的。所以失败。
第三次一个也没长。
今天在做一批试试。。。。。。只能是试试

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12楼2015-09-11 14:07:07

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吗子

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引用回帖:

11楼: Originally posted by 酒家何处 at 2015-09-11 13:13:40
我们一直用mbi的酶。看起来按u算比nebtakara贵好多

你们做连接的时候是怎么算U值，然后确定加多少样连的？我老师让我重新算好再确定比例连接。

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深秋

13楼2015-09-11 14:57:16

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吗子

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引用回帖:

12楼: Originally posted by yigeerliu at 2015-09-11 14:07:07
我第一次做的时候，只长了一个菌，然后酶切、PCR都对，去测序，目的蛋白也没问题，但是后来发现载体突变，所以失败。
第二次长了很多很多，但是都是假阳性的。所以失败。
第三次一个也没长。
今天在做一批试试 ...

你连接体系和比例怎么样，我是16℃过夜连的。

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深秋

14楼2015-09-11 14:58:39

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