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狼的梦2011

铁虫 (初入文坛)

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专业: 同位素地球化学

[求助] 求助：土壤硝化-反硝化过程中各环节催化酶，哪些酶活是有测定方法的？已有4人参与

各位大侠，小弟想测测土壤硝化-反硝化过程中酶活性，但是发现有些环节的酶活性没有测定方法。例如，氨单加氧酶、羟胺氧化酶、亚硝酸盐氧化酶、一氧化氮还原酶、一氧化二氮还原酶。有没有哪位大侠给予一些指点啊。如果有测定方法，能提供一下，小弟不甚感激啊！

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sun_681991

银虫 (初入文坛)

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专业: 微生物资源与分类学

【答案】应助回帖

您好！！我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法（如下），其中“剧烈震荡终止反应”，请问具体是如何操作的？？？谢谢你啦！！

方法：采用改进后的格里斯试剂染色法进行测
定 ,测定酶活反应体系共250 μL:
0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL,
0. 1 mol/L NaCl 15μL,
0. 1 mol/L NO2    12.5 μL,
0. 1 mol/L MV    7.5μL,
0. 1 mol/L Na2S2O4 40 μL,
酶液             50 μL。
30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加
10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸
盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝
酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位（U）