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狼的梦2011铁虫 (初入文坛)
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[求助]
求助：土壤硝化-反硝化过程中各环节催化酶，哪些酶活是有测定方法的？ 已有4人参与
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各位大侠，小弟想测测土壤硝化-反硝化过程中酶活性，但是发现有些环节的酶活性没有测定方法。例如，氨单加氧酶、羟胺氧化酶、亚硝酸盐氧化酶、一氧化氮还原酶、一氧化二氮还原酶。有没有哪位大侠给予一些指点啊。如果有测定方法，能提供一下，小弟不甚感激啊！ |
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sun_681991
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【答案】应助回帖
您好！！我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法（如下），其中“剧烈震荡终止反应”，请问具体是如何操作的？？？谢谢你啦！！ 方法：采用改进后的格里斯试剂染色法进行测 定 ,测定酶活反应体系共250 μL: 0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL, 0. 1 mol/L NaCl 15μL, 0. 1 mol/L NO2 12.5 μL, 0. 1 mol/L MV 7.5μL, 0. 1 mol/L Na2S2O4 40 μL, 酶液 50 μL。 30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加 10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸 盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝 酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位（U） |
5楼2015-12-24 10:51:04
sun_681991
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2楼2015-12-15 18:46:17
3楼2015-12-21 11:06:13
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【答案】应助回帖
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您好！！我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法（如下），其中“剧烈震荡终止反应”，请问具体是如何操作的？？？谢谢你啦！！ 方法：采用改进后的格里斯试剂染色法进行测 定 ,测定酶活反应体系共250 μL: 0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL, 0. 1 mol/L NaCl 15μL, 0. 1 mol/L NO2 12.5 μL, 0. 1 mol/L MV 7.5μL, 0. 1 mol/L Na2S2O4 40 μL, 酶液 50 μL。 30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加 10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸 盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝 酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位（U） |
4楼2015-12-24 10:50:41
