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狼的梦2011

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助:土壤硝化-反硝化过程中各环节催化酶,哪些酶活是有测定方法的? 已有4人参与

各位大侠,小弟想测测土壤硝化-反硝化过程中酶活性,但是发现有些环节的酶活性没有测定方法。例如,氨单加氧酶、羟胺氧化酶、亚硝酸盐氧化酶、一氧化氮还原酶、一氧化二氮还原酶。有没有哪位大侠给予一些指点啊。如果有测定方法,能提供一下,小弟不甚感激啊!
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sun_681991

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好!!我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法(如下),其中“剧烈震荡终止反应”,请问具体是如何操作的???谢谢你啦!!
方法:采用改进后的格里斯试剂染色法进行测
定 ,测定酶活反应体系共250 μL:
0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL,
0. 1 mol/L NaCl    15μL,
0. 1 mol/L NO2     12.5 μL,
0. 1 mol/L MV       7.5μL,
0. 1 mol/L Na2S2O4   40 μL,
酶液              50 μL。
30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加
10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸
盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝
酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位(U)
我爱香菜!
4楼2015-12-24 10:50:41
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查看全部 13 个回答

sun_681991

银虫 (初入文坛)

你好啊,请问您找到测定这些酶的酶活测定方法了吗?
我爱香菜!
2楼2015-12-15 18:46:17
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liwe

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有一篇EST文献中提到氨单加氧酶,亚硝酸盐氧化酶等酶活性测定方法。文献名为:Effects of ZnO Nanoparticles on wastewater biological nitrogen and phosphorus removal
3楼2015-12-21 11:06:13
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sun_681991

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好!!我想问一下测定亚硝酸盐还原酶酶活的方法(如下),其中“剧烈震荡终止反应”,请问具体是如何操作的???谢谢你啦!!
方法:采用改进后的格里斯试剂染色法进行测
定 ,测定酶活反应体系共250 μL:
0. 1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6. 5) 125μL,
0. 1 mol/L NaCl    15μL,
0. 1 mol/L NO2     12.5 μL,
0. 1 mol/L MV       7.5μL,
0. 1 mol/L Na2S2O4   40 μL,
酶液              50 μL。
30℃水浴中反应10 min,剧烈振荡终止反应。加
10μL格利斯试剂显色,在520 nm比色测定亚硝酸
盐的变化。酶活定义为:每min还原1μmoL亚硝
酸盐所需要的酶量定义为一个酶活力单位(U)
我爱香菜!
5楼2015-12-24 10:51:04
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