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白色实验服新虫 (初入文坛)
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测定土壤酶活力过程中的问题 已有3人参与
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小弟最近在测定土壤酶活力，常见的几种酶。像蔗糖酶（比色法）、脲酶（苯酚钠-次氯酸钠比色法）、蛋白酶（茚三酮比色法）、纤维素酶（硝基水杨酸比色法）等…… 但是，在测定蛋白酶的时候出现一系列问题如下： 1：1、蛋白酶测定的时候，实验组和对照组（无土+无基质）全部出现茶色，并没有出现应该出现的蓝紫色，做了四次，全部都是茶色，不知道哪里出现问题了； 2、用酪素做基质，波长为500nm，用明胶做基质，波长为560nm，请问到底波长用多少合适？ 3、培养结束后，过滤之前还是之后加入沉淀蛋白质的试剂，加入后需不需要离心？离心转速多少？离心在过滤之前还是过滤之后好？ 4、没有离心，培养后直接过滤，过滤速度很慢（超级慢的那一种），这个现象合理不合理，如果不合理，该怎么做？ 5、用酪素做基质，标准曲线用甘氨酸绘制？还是酪氨酸绘制？明胶做基质曲线用什么绘制呢？（查阅了很多文献，方法有的各不相同，希望大神解答……） 我用茚三酮比色法（酪素基质），测定波长为500nm；加勒斯江法（明胶基质），测定波长为560nm；实验还是不出结果，希望虫友帮助，小弟不胜感激…… 在测定纤维素酶活力的时候，出现过滤很慢（无法想象的慢，甚至我怀疑过滤都停止了），不知道离心或者用布氏漏斗可以不可以（今天打算试一下的）……或者虫友有更好的解决办法。 第一次发帖，不便之处请见谅。刚签到三天，金币不多……希望大家能帮小弟解决这些问题，在线等。 |
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9楼2015-08-29 20:22:40
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