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vivi3168

新虫 (小有名气)

[求助] 青霉摇床培养

要对指状青霉摇床培养获取菌丝体进行抑菌试验,但是遇到问题了,从活化了3天的平板上制备了1*10的6次方cfu/mL的孢子悬浮液,然后向40mL(250ml的三角瓶)的PDB液体培养基中加入200μL的孢子悬浮液进行摇床培养,因为看到有说加玻璃珠可以减少菌丝球形成,于是加了每瓶加了10个,然而今天已是摇床的第3天,液体培养基中只是出现了一些白色的渣状的物质(很少),应该就是菌丝吧,液体培养基也有些许浑浊。。。
     之前也做过两次次摇床,第一次只是没加玻璃珠,孢子悬浮液浓度比这次稍大一些,第二天就长了很多成团的菌丝;第二次也是没加玻璃珠,菌液含量比这两次都高,然而摇床第一天啥也没长,第二天晚上实验室停电也没再继续摇,正常来讲的话应该48h就可以收获菌丝体了。
    菌种再PDA上生长的很好,为啥到PDB里这样了?难道是接种量和玻璃珠的问题?还有一个问题要做抑菌物质对菌丝体内容物的泄漏试验,那收获的菌丝体是什么形态比较好呢?请前辈们指教啊,谢谢!
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vivi3168

新虫 (小有名气)

补充一下:摇床温度28℃,转速150r/min
2楼2015-08-24 11:04:57
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543669145

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by vivi3168 at 2015-08-24 11:04:57
补充一下:摇床温度28℃,转速150r/min

生物体每次活力不一定都一样,所以培养的时间可以根据情况适当调整。多数霉菌在液体培养基中形成菌丝球,个别和细菌在液体培养基中一样浑浊生长。 形成菌丝球的霉菌当然最好形成小菌丝球(菌丝球大小还和培养时的转数、培养时间、营养条件有关。),液体成分较清亮,这样明显看 菌体没被污染。做抑菌试验时,可将菌丝球无菌混匀或研磨。
3楼2015-08-26 08:56:16
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vivi3168

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 543669145 at 2015-08-26 08:56:16
生物体每次活力不一定都一样,所以培养的时间可以根据情况适当调整。多数霉菌在液体培养基中形成菌丝球,个别和细菌在液体培养基中一样浑浊生长。 形成菌丝球的霉菌当然最好形成小菌丝球(菌丝球大小还和培养时的转 ...

培养至第四天的时候有菌丝形成了,这个得自己好好摸索摸索,谢谢你的回复~
4楼2015-08-26 09:25:14
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潜心科研

新虫 (初入文坛)

你好,请问你的PDB培养基配方是什么 ,谢谢
5楼2015-11-03 09:03:36
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vivi3168

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 潜心科研 at 2015-11-03 09:03:36
你好,请问你的PDB培养基配方是什么 ,谢谢

就是PDA不加琼脂~
6楼2015-11-03 18:19:59
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