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我的测序无信号是什么问题？？
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我用TA克隆得到了一个样，ＰＣＲ鉴定正确，然后将菌液拿去测序，片段大约１５００BP左右，用通用引物测序。一侧引物成功的测了出来，大约1000BP，另一侧引物没有信号，因此，我怀疑是质粒不纯，又纯化了一次，也是用ＰＣＲ鉴定，结果与母的条带同，且带单一，当时就拿PCR产物和自己的引物去测序了，没有送质粒。结果还是没有信号！ 不知道是什么原因？？望求高手解答！ 注：我做的事3' RACE ,这个成功测序结果包括了我的EST，测序不成功的就是3‘ploA尾巴那一段！！为什么同样一个质粒就不能测成功呐？？ |
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