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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我的测序无信号是什么问题？？
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glilyq

银虫 (正式写手)

[交流] 我的测序无信号是什么问题？？

我用TA克隆得到了一个样，ＰＣＲ鉴定正确，然后将菌液拿去测序，片段大约１５００BP左右，用通用引物测序。一侧引物成功的测了出来，大约1000BP，另一侧引物没有信号，因此，我怀疑是质粒不纯，又纯化了一次，也是用ＰＣＲ鉴定，结果与母的条带同，且带单一，当时就拿PCR产物和自己的引物去测序了，没有送质粒。结果还是没有信号！
不知道是什么原因？？望求高手解答！
注：我做的事3' RACE ,这个成功测序结果包括了我的EST，测序不成功的就是3‘ploA尾巴那一段！！为什么同样一个质粒就不能测成功呐？？
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让梦想不断向前！
1楼 2008-08-19 21:58:20
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glilyq

银虫 (正式写手)
多谢指点。我怎么就没有想起来设计新引物测呐。再次感谢！！
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让梦想不断向前！
3楼2008-08-19 23:18:24
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
很可能是3‘ploA尾巴在测序反应时出现了问题
那样的话，再测还是可能不出，因为没有解决实质问题
由于已测出1000bp
建议在900-1000间重新合成一段引物，使用它进行测序（如果确实想序列的话）
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2楼2008-08-19 22:40:32
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
呵呵
肯花钱就行
对你有帮助很高兴
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4楼2008-08-19 23:20:50
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